jueves, 24 de marzo de 2011

PROGRAMA DE T.E. DONADORA 5766 BRAHMÁN BLANCA PURA

PROGRAMA DE TRANSFERENCIA DE EMBRIONES

GRANJA AGROINDUSTRIAL Y FORTALECIMIENTO EMPRESARIAL DE CASANARE


La transferencia de embriones es una de las principales competencias del programa Tecnólogo en Reproducción Bovina, luego de un proceso teórico en el cual se adquirieron conocimientos en cada una de las actividades y parámetros, enfocados a realizar un proceso real se toma la decisión de realizar el proceso práctico con la ganadería del centro de formación.

Teniendo en cuenta los parámetros de selección de donadoras y receptoras, y los animales a disposición escogimos como donadora 5766 Brahmán Blanca Pura, con condición corporal 4.0. Días atrás al programa, éste animal presentó problemas en los cascos de las extremidades anteriores (podermatitis) debido a ésta complicación el animal se mantuvo en un alto nivel de estrés y dolor, fue tratado con lavados (desinfección, yodo) y se aplicó casquil ungüento para fortalecer el casco. Con éste tratamiento el animal fue recuperado.


Lo primero que se hizo fue sujetar al animal, para luego manearlo y así proceder a su derribamiento.

El día 11 de febrero de 2011, la donadora Brahmán Blanca presenta celo natural, nueve días después de haber presentado el celo natural (20 de febrero de 2011) se le inicia la superovulación con folltropin-V dosis 2.0 ml intramuscular, estas dosis son aplicadas am-pm en orden descendente hasta el día 23 de febrero terminando con una dosis de 0,5 ml intramuscular am de folltropin-V. Para la aplicación de la hormona se diluyó el día de inicio de la superovulación la porción liofilizada teniendo en cuidado de sacar el aire del frasco, se refrigeró a 4°C y se usó aguja desechable únicamente para sacar medicamento.

El día 24 y 25 de febrero de 2011, 6.00 pm y 6:00 am respectivamente después de observar celo,se llevó a cabo la IATF, se utilizó Pajilla Los Ejidos el Guindo 449-0 Brahaman Reg. 459845 2.12.03 Empresa Genética especial 5476 EGE LTDA.

Celo de la Donadora
IATF

RECOLECCIÓN DE LOS EMBRIONES (LAVADO DE CUERNOS)

El día 03 de marzo de 2011 se llevó a cabo la recolección de embriones clasificación y transferencia a la receptora, por lo general la recolección se realiza entre el día 7 después de la IATF, la metodología empleada para la obtención de los embriones consiste en colocar un medio líquido en los cuernos, este líquido está compuesto de 90 ml de Vigro PBSS diluido en 500 ml de Suero Lactato de Ringer para la simulación del ambiente uterino para que no haya degeneración de los embriones, para luego por medio de un masaje muy delicado despegar los embriones de los cuernos, luego se puede decir que se provoca una corriente de arrastre que llevará los embriones aun filtro.

Aseo de las instalaciones antes del procedimiento

Se procura que al filtro donde permanecen los embriones no se les puede dejar dar la luz directa, terminado el lavado del cuerno derecho se retira la misma cantidad de liquido del balón de la sonda folley que inicialmente se había introducido; retiramos la sonda y pasamos al cuerno izquierdo para realizar de la misma forma el lavado, en general para realizar este lavado se utilizaron 4 bolsas de Lactato de Ringer con 90 ml de Vigro PBSS, cada una.

Al final del lavado se aplica prostaglandina se utilizó Estrumate con la aplicación de 2.0 ml y una segunda aplicación para el día 10 de marzo del 2011 para eliminar cuerpos lúteos.

BÚSQUEDA Y CLASIFICACIÓN DE EMBRIONES

Los embriones recolectados en el filtro con el BPSS es vertido en una placa de búsqueda de embriones, la búsqueda se recomienda hacerla con mucho cuidado, a medida que se identifican los embriones los mismos son aspirados mediante micropipetas y colocados en una caja de petri con PBSS. Una vez finalizada la búsqueda se procede a la clasificación de los embriones Luego de una minuciosa búsqueda de embriones por un largo tiempo en el estereoscopio el resultado del proceso es pobre al no hallar ningún embrión del lavado de la Brahmán Blanca, la donadora negra 5805 aportó 2 embriones de calidad excelente 4,1 y 5,1 éste último fue congelado y transferido a la receptora 5764.

Posterior a la clasificación el embrión calidad 5,1 se empacó en la pajuela para ser transferido a receptora en fresco. El embrión calidad 4,1 se empacó de igual forma la única diferencia fue que el medio que contiene el embrión fue etilenglicol (medio ideal para congelación).

EMPAQUE Y CONGELACIÓN DE EMBRIONES

Mientras se realizó el lavado del embrión y el empaque, la congeladora de embriones se dejó llena de nitrógeno líquido y programada para que se estabilizara (-0.7), posterior a ello se procede a congelar soplando el nitrógeno y pasando la pajilla sobre el nitrógeno evaporado, este paso se realiza para evitar el choque térmico, introducción de la pajilla, tapado de la congeladora por dos minutos, destapamos luego reponemos nuevamente el nitrógeno líquido realizamos siding y desprogramamos el estabilizador, introducción de pajilla con embrión en 10 minutos este comienza a congelar, y 60 minutos para llegar a -30ºC y se echa en el termo criogénico a -196ºC.



Participantes: Tec. Rep Bovina

Geiner Pinzón Daza
Oscar Leonardo Alvarez Batanero
Angela Patricia Gonzaléz Millán
Martha Yolima Angel Gonzaléz
Harvey Llojauder Castro Guanay
Blanca Yaneth Rocha Rincón




PROTOCOLO T.E DONADORA Nª 5805 CELO SINCRONIZADO

PROTOCOLO DE T.E
DONADORA NEGRA 5805
GRANJA: SENA
INTEGRANTES:
CONSUELO LIZARAZO
MIREYA MUÑOZ
DIANA MALDONADO
MILENA ROJAS
YESID ORTIZ



¿Qué es una Transferencia de Embriones?
Es una técnica para el mejoramiento genético del ganado, consiste en provocar que una vaca o vaquilla "donadora", mediante un tratamiento hormonal e inseminación con un toro probado con un alto valor genético, produzca varios embriones que siete días después le son extraídos para ser transferidos a otras hembras “receptoras”, que previamente fueron sincronizadas con el calor de la "donadora". La receptora no transmite ninguna característica genética a la cría y sólo sirve para mantenerla hasta el parto y durante la lactancia.

¿Por qué se Realiza la Transferencia de Embriones?
En condiciones normales, cada vaca produce una sola cría al año, lo cual significa que cuando mucho producirá 6 a 8 becerros durante su vida. A través de la inseminación artificial se pueden obtener miles de crías de un toro; con la transferencia de embriones se han llegado a tener más de cien crías de una vaca durante su vida productiva, lo cual facilita el mejoramiento genético, con el consecuente incremento de la producción de carne y/o leche
ETAPAS DE LA TRANSFERENCIA DE EMBRIONES

La técnica de la Transferencia de Embriones incluye varias etapas, desde la selección de donadoras hasta la transferencia del embrión. Las principales etapas relacionadas son:

a. Inducción de la superovulación (donadora)
b. Sincronización del ciclo estral (receptoras)
c. Recolección de los embriones (donadora)
d. Clasificación de los embriones
e. Almacenamiento por corto plazo y cultivo
f. Criopreservación
g. Transferencia de los embriones (receptoras)

En la actualidad han sido factibles muchas otras técnicas relacionadas con la TE como el sexado, la micromanipulación, la fertilización in vitro y la donación.
VACAS DONADORAS
El valor de la donadora puede ser definido de acuerdo a diferentes criterios según los beneficiarios. Sin embargo, en el caso de la aplicación práctica de la técnica para el mejoramiento genético del ganado, debemos escoger a las vacas más productivas como donadoras. Además, estas vacas, deben de cumplir con los siguientes requisitos:

a. No presentar enfermedades hereditarias
b. Tener excelente historial reproductivo y salud
c. Alto valor en el mercado
d. Ciclos estrales regulares
e. No tener enfermedades que afecten la fertilidad
f. No ser demasiado viejas.
VACAS RECEPTORAS
Básicamente deben reunir las características de sanidad y control reproductivo al igual que las donadoras, estos animales pueden ser de cruzas comerciales o de raza distinta a la donadora.

Se refieren vacas con una conformación de media a grande, que tengan buen instinto materno (que hayan parido con anterioridad), y que tengan un diagnostico previo de no preñez.

HEMBRAS SELECCIONADAS COMO DONADORA Y RECEPTORA PARA EL PROGRAMA DE TRANSFERENCIA DE EMBRIONES POR EL GRUPO DE REPRODUCCION BOVINA EN LA GRANJA SENA REGIONAL CASANARE.

HEMBRA DONADORA


HEMBRA RECEPTORA

Sincronización Estral Donadora/Receptora

Se ha demostrado que para transferir con éxito embriones debe existir una adecuada sincronía entre el calor de la donadora y el de la receptora, el embrión requiere un medio ambiente uterino propicio para poder continuar se desarrollo y convertirse posteriormente en un becerro vivo, que es el producto final del proceso.

Para el proceso de sincronizacion se trabajo con los siguientes protocolos:

Donadora: Dib-gestavec-benzoato de estradiol-folltropin-sincrocio

Receptora: Dib-benzoato de estradiol- folligon-sincrocio

PALPACION PARA DETERMINAR EL ESTADO
DEL APARATO REPRODUCTOR DE LAHEMBRA BOVINA

IMPLANTE DIBCOLOCACION DEL DIB

CORDON PARA HALAR EN EL MOMENTO DEL RETIRO


AC Accion del DIB: la progesterona a partir de la colocación del dispositivo es importante sobre la dinámica folicular ovárica, provoca la regresión del folículo dominante y acelera el recambio de las ondas foliculares, esto cese de la secreción de productos foliculares (estrógeno e inhibina) produce el aumento de FSH que va ser responsable del comienzo de la siguiente onda folicular.

ACCION DEL BENZOATO: Provoca una nueva onda folicular, la aplicación del benzoato de estradiol a la extracción del progestágeno induce un pico preovulatorio de LH a través del feed back positivo del estradiol sobre el GnRH Y LH lo que resulta una alta sincronía de ovulaciones.

GESTAVEC: solución estéril de uso parenteral contiene progesterona, hormona luteinica



APLICACION GESTAVEC
APLICACION DEL BENZOATO
APLICANDO DIB A LA RECEPTORA




DIAS DESPUES SE RETIRO DIB Y SE OBSERVO EL CELO EN LAS DOS HEMBRAS

Detección de Estros
Un aspecto de vital importancia para obtener buenos resultados en los programas de I.A. y transferencia de embriones es la detección de calores es observar, identificar e interpretar los signos externos de celo manifestados por las hembras.
Probablemente la razón mas importante por la que fracasan los programas reproductivos es la inadecuada detección de los estros. La eficacia de esta depende del tiempo y la frecuencia que se dedique.

RECEPTORA DONADORA
INSEMINACION.
A las Hembras donadoras se les insemina de 2 a 3 veces con semen de alta calidad genética.
La Donadora que se trabajo se insemino con: Bramahan.
RETIRO DE LA PAJILLA DEL TERMO PARA DESCONGELARLA.
PASO DE LA PAJILLA AL TERMO DESCONGELADOR A UNA TEMPERATURA DE 37°C.
ARMADA DE LA PISTOLA DE INSEMINARINSEMINACION.Recolección y Transferencia
A los 7 días después de la inseminación artificial de las donadoras se recolectan los embriones por medio de un lavado uterino. La mayoría de los embriones se encuentran en la punta de los cuernos uterinos conservando una cubierta protectora (Zona Pelúcida), que facilita su manipulación.
Inmediatamente después se intensifican, evalúan y clasifican los embriones para posteriormente transferidos a las hembras receptoras.
Los pasos para desarrollar esta práctica, una vez hayan sido superovuladas e inseminadas las hembras, son:
  • Palpación y Ecografía para estimar número de cuerpos lúteos.
  • Anestesia epidural.
  • Higiene de la vulva y zonas adyacentes.
  • Secado.
  • Introducción de un brazo por vía rectal.
  • Introducción de la sonda Foley vía vaginal.
  • Pasamos vagina, cervix, cuerpo y llegamos al cuerno.
  • Retiramos un poco el estilete.
  • Inflamos el balón con medio de lavado (PBS).
  • Sacamos el estilete.
  • Liberamos medio y lavamos el cuerno.

MATERIALES

Mangas de palpación; Guantes de látex; Lactato de Ringer; PBS (Medio de lavado); Sondas Foley; Estiletes; Medios de conducción; Filtros (Minitube); Cajas de Petri; Alcohol; Jeringas; Lidocaína (Sin epinefrina).

PROCEDIMIENTO

Palpamos los ovarios por vía rectal para comprobar la respuesta al tratamiento de superovulación. Luego de la palpación se puede hacer uso del ecógrafo. Si la respuesta fue positiva procedemos a pasar la sonda Foley y a lavar los cuernos.

Una vez hayamos lavado los dos cuernos llevamos el filtro al laboratorio improvisado en la finca para comenzar su busqueda y clasificación.

Se buscan los embriones y estructuras infertilizadas con magnificación 15x. Una vez encontrados se separan los ovocitos infertilizados y los embriones degenerados de los buenos o viables. Los embriones viables se llevan a otra caje de Petri con medio PBS y una vez haya terminado la busqueda y clasificación se lavan 10 veces.

Si los embriones van a ser transferidos en fresco se empajillan en medio PBS y si van a ser congelados se empajillan en Etilenglicol (EG). En este caso vamos a preparar los embriones para congelarlos..

PALPACION DE LOS OVARIOS Y LA RSPUETA DE ESTOS
AL TRATAMIENTO DE SUPEROVULACION
APLICACION DE LIDOCAINA
DIAGNOSTICPOR ECOGRAFIA
MATERIALES PARA LA REALIZACION DE LA COLECTA DE EMBRIONES

PREPARACION DEL MEDIO (PBS)
PASO DE LA SONDA FOLEY POR EL CERVIX
LLENADO DE BALONCONECTANDO LOS CONDUCTOS A LA SONDA FOLEY
MANEJO DE LLAVES DE LOS CONDUCTOS
RECOLECCION EN ELFILTRO

TRANSPASO DE LOS EMBRIONES EN EL FILTRO A LAS CAJAS DE PETRI
LIMPIEZA DE LOS EMBRIONES POR LA 10 GOTAS DE HOLDING
EMBRION SELECCIONADO PARA TRANSFERIR EN FRESCO

LLENADO DE LA PAJILLA CON EMBRION 4.2 PARA TRANSFERIR EN FRESCO
MARCADO DE LA PAJILLA

NIVELACION DE LA CONGELADORA PRA REALIZAR EL PROCESO DE CONGELACION DE LOS EMBRIONES RESTANTES

SUJECCION DE LA RECEPTORA PARA IMPLANTAR EL EMBRION
HEMBRA RECEPTORA
APLICACION DE LIDOCAINA( ANESTESIA EPIDURAL)
PISTOLA DE TRANSFERENCIA LISTA PARA IMPLANTACIONIMPLANTACION DEL EMBRION A LA HEMBRA RECEPTORA

Gracias.
























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